鸡精和味精中酸性橙Ⅱ号的检测——SPE/HPLC法解决方案

鸡精和味精中酸性橙Ⅱ号的检测——SPE/HPLC法解决方案

参考标准《SN/T 3536-2013 出口食品中酸性橙Ⅱ号的检测方法》

酸性橙Ⅱ属于化工染料，通常是金黄色粉末，故俗称金黄粉。食品工业中，酸性橙Ⅱ属非食用色素，食品中禁止加入。这些物质如果在食品加工中使用，人食用后可能会引起食物中毒，长期食用甚至会致癌。

依据《SN/T 3536-2013 出口食品中酸性橙Ⅱ号的检测方法》，开发了《鸡精和味精中酸性橙Ⅱ号的检测》方案：
采用氨水乙腈提取、ProElut NH2固相萃取柱净化、高效液相色谱法检测；
具有前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好、净化效果优异等特点；
定量限是0.1 mg/kg，与标准方法一致；
过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低。
1、适用范围

本方案适用于鸡精和味精中酸性橙Ⅱ的检测，方法定量限0.1 mg/kg。
 
2、 标准品配制
储备液100 mg/mL，准确称取各标准品，用水配制成100 μg/mL的储备液。
中间液10 μg/mL，分别吸取各单标标准储备液，用水配制成10 μg/mL的中间液。
 
3、提取
2 g样品，加入20 mL 氨水乙醇溶液，超声提取10 min，振荡5 min，6000 rpm离心2 min，收集上清液；
下面残渣再用20 mL氨水乙醇溶液重复提取一次，合并两次上清液；
取出20 mL上清液，40 ℃下减压蒸至低于5 mL，用水定容至10 mL，混匀，准备净化。

4、净化—— ProElut NH2 500 mg/6 mL（Cat.# 63305）

(1)活    化：
依次向柱中加入6 mL甲醇、6 mL 2%甲酸水，弃去流出液；
 
(2)上    样： 
将待净化液加入柱中，弃去流出液；
 
(3)淋    洗：向柱中一次加入6 mL 2%甲酸水和6 mL甲醇，弃去流出液；
(4)洗    脱：向柱中加入6 mL 10%氨水甲醇，收集流出液；
 
(5)定    容： 
将洗脱液在50 ℃下氮吹近干，用水定容至1 mL，上机分析。
 
5、色谱条件
色谱柱：Diamonsil C18(2)  250mm×4.6 mm，5um（PN:99603）
流速：1.0mL/min
进样量：20uL
柱温：35 ℃
检测器：UV 484 nm
流动相：甲醇：0.02 mol/L乙酸铵=65:35

6、摘要：
迪马科技开发的《鸡精和味精中酸性橙Ⅱ号的检测》，依据《SN/T 3536-2013 出口食品中酸性橙Ⅱ号的检测方法》，采用氨水乙腈提取、ProElut  NH2固相萃取柱净化、高效液相色谱法检测。本方案具有：前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好、净化效果优异等特点；定量限是0.1 mg/kg，与标准方法一致；过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低。

原创作者：济南赛畅科学仪器有限公司